DPPH法
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DPPH法是一种基于1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)的体外抗氧化能力测定方法,于1958年提出,主要用于定量检测生物试样、纯化合物及提取物的自由基清除能力。该自由基分子式为C18H12N5O6,呈暗紫色棱柱形晶体,分解温度127~129℃,具有刺激性,实验操作需穿戴防护装备 。
DPPH自由基在有机溶剂中稳定,其517nm波长处吸光度变化可反映抗氧化活性:当抗氧化成分提供电子或氢离子时,自由基单电子被捕获导致吸光度降低,抑制率与抗氧化能力呈正相关 。由于DPPH为亲脂性自由基,存在生物体系适用性局限,2-苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-1-氧基3-氧化物(PTIO)自由基清除法被开发为替代方案,可在水溶液或pH7.4缓冲液中进行测定 。该方法已应用于葡萄籽原花青素等物质的抗氧化能力评价 。
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